# 第6章 — 固定化生物催化为GalNAc偶联从实验室原型到GMP候选药物提供可信路径

三条平行发展路线在2020年至2026年间交汇，共同确立了固定化生物催化（immobilized biocatalysis）作为替代GalNAc偶联中化学保护基策略的最具技术可信度的路径——针对的是双靶点siRNA的GalNAc偶联：SUGAR-TARGET糖基转移酶级联反应（Makrydaki等，*Nat Chem Biol* 2024）在80余小时内实现四轮酶循环利用，活性保留率超过70% [src_C05]；CLEA-LentiKats脂肪酶制剂在深共熔溶剂（DES）中经至少六个连续流循环累计产出每升10 g产品 [src_C10]；Codexis ECO固定化聚合酶/磷酸酶反应器在底物浓度6 mM条件下实现寡核苷酸偶联效率超过98% [src_B11]。上述路线的技术成熟度（TRL）现已达到5–7级，较2022年前的3–4级显著提升——与GMP就绪状态（TRL 8–9）的差距已缩小至监管工艺验证文件层面，而非基础化学层面的障碍。

双靶点siRNA的战略价值逻辑清晰。每增加一条GalNAc臂——从三天线（3×）到四天线（4×）乃至更多——化学合成中的保护基操作步骤就成倍增加。固定化糖基转移酶能以超过95%的转化率完成末端GalNAc残基的安装，从而规避原子经济性损失，也免去了铜催化叠氮-炔烃环加成（CuAAC）点击化学在商业化规模下难以满足ICH Q3D铜残留要求的合规负担 [src_C08, src_C09]。
