Novel endo-alpha-N-acetylgalactosaminidases with broader substrate specificity

EngEF (E. faecalis) 序列进入公共领域的核心文献，先公开奠定 FTO 基础；作者为 NEB 雇员但已在学术期刊公开发表


Molecular cloning, expression, and characterization of a novel endo-alpha-N-acetylgalactosaminidase from Enterococcus faecalis

Goda HM
Ushigusa K
Ito H
Okino N
Narimatsu H
Ito M

日本团队独立克隆 E. faecalis GH101，与 Koutsioulis 2008 同年独立发表，相互印证 EngEF 序列公共领域地位


America Invents Act (AIA), Pub.L. 112-29, 35 U.S.C.

美国专利法 AIA 先申请制与现有技术规则，第三方公开不享有宽限期豁免


The structural basis for T-antigen hydrolysis by Streptococcus pneumoniae: a target for structure-based vaccine design

Caines ME
Zhu H
Vuckovic M
Willis LM
Withers SG
Wakarchuk WW
Strynadka NC

SpGH101 首个晶体结构（2.9 Å），明确为学术公开，确立 SpGH101 结构进入公共领域


Mechanistic investigation of the endo-alpha-N-acetylgalactosaminidase from Streptococcus pneumoniae R6

Willis LM
Zhang R
Reid A
Withers SG
Wakarchuk WW

确认 SpGH101 催化残基 D764（亲核）和 E796（广义酸碱），机制研究进入公共领域


EP3149034B1 - Deglycosylation reagents and methods

Magnelli P
Guthrie E
Taron CH
Xu MQ
Buswell J

NEB 核心脱糖基化专利；独立权利要求聚焦 N-糖苷酶+非 SDS 表面活性剂体系；O-糖苷酶仅在从属权利要求中出现。预计 2035 年到期，中国同族专利状态需 CNIPA 独立核查


Structural basis of mammalian mucin processing by the human gut O-glycopeptidase OgpA from Akkermansia muciniphila

Trastoy B
Naegeli A
Anso I
Sjogren J
Guerin ME

Co-author Sjogren affiliated with Genovis AB

OpeRATOR 晶体结构公开，是下一代酶结构进入公共领域的里程碑；但 Genovis 商业化工艺可能仍受保护


Design of a mucin-selective protease for targeted degradation of cancer-associated mucins

Stanford University holds related patents licensed to Palleon

eStcE 为黏蛋白选择性蛋白酶（切肽键），与本项目 O-糖苷酶（切糖苷键）属不同酶类，不构成直接 FTO 障碍


A high-throughput screening platform for enzymes active on mucin-type O-glycoproteins

Wardman JF
Sim L
Liu J
Howard TA
Geissner A
Danby PM
Boraston AB
Wakarchuk WW
Withers SG

UBC holds patent on this platform methodology

Withers/UBC 高通量 O-糖肽酶筛选平台（FRET 探针+液滴微流控），已申请 UBC 专利；方法受保护，但筛选所得新酶序列不受此专利覆盖


Discovery and Development of Promiscuous O-Glycan Hydrolases for Removal of Intact Sialyl T-Antigen

Wardman JF
Rahfeld P
Liu F
Morgan-Lang C
Sim L
Hallam SJ
Withers SG

Withers group has filed patents on related technologies (UBC)

SpGH101 Q868G 突变体首次公开报道，可切除完整唾液酸 T-抗原；宏基因组筛选发现 GH101 家族隐性 STAg 水解活性


Discovery and engineering of enzymes for the manipulation of glycoproteins (PhD Thesis)

UBC academic thesis, independent research

系统描述 STAg 水解酶发现、超高通量液滴筛选平台及最优突变体（140倍活性提升）


Dual functional POGases from bacteria encompassing broader O-glycanase and adhesin activities

See Nature Communications 2025 author list

Need to check if patent filed before publication

2025 年最新 GH101 研究，POGase 宽谱酶（sialyl Core 1/2/3）；Kcat/Km 比 EngEF 高 >300 倍；Motif-1/2/3 三段特征序列与已知酶不同，为新进者提供骨架参考。需核查发表前是否有专利申请


Reshaping of a Glycoside Hydrolase Active Site through Expression in Vivo Directed Evolution

UBC Withers group, related patents may be filed

SpGH101 Q868G 定向进化后活性提升 140 倍，证明 Withers/UBC 正在积极推进该方向专利布局，新进者需选择 EngEF 同源位点或全新骨架


Identification and Molecular Cloning of a Novel GH Family of Core 1 Type O-Glycan-Specific Endo-alpha-N-Acetylgalactosaminidase from Bifidobacterium longum

GH101家族创始文献，确认TIM-barrel结构和GH13同源性，保留型机制


SpGH101 Crystal Structure (PDB 3ECQ, 2.9A) - Pluvinage/Willis et al.


NEB资助，作者为NEB员工，已披露

关键：NEB内部选型报告。EngEF kcat=51.17 s-1 for Core1，最高；Core3 100%；E.coli pET-21a验证


BRENDA EC 3.2.1.97 - E. faecalis B5UB72 (EngEF)


O-Glycosidase 324716 - Merck Sigma-Aldrich Product Page


Libios EngEF (E-OGLYEF) Technical Data Sheet, Lot 130201c

EngEF批次实测数据：MW 158800 Da，pI 5.2，比活3.0 U/mg，pH 7.5


NEB O-Glycosidase P0733 Product Page + NEB Glycoproteomics Technical Guide

P0733 40M units/mL，GlycoBuffer 2，37°C，需Neuraminidase预处理


Discovery and Development of Promiscuous O-Glycan Hydrolases (Q868G SpGH101 mutant)


Novel Enzymes for O-glycan Analysis - Genovis CASSS 2018 Poster


POGase宽谱酶发现；EngCP天然G868仍无sialyl Core 1活性，是Q868G反方证据。EngEF Km Core1=15.3 uM


SHuffle T7 Competent E. coli C3026 - NEB Product Page

SHuffle T7：Δgor ΔtrxB胞质氧化，DsbC组成型表达，BSL-1，适合复杂蛋白表达


E. coli Cytoplasmic Expression of Disulfide-Bonded Proteins: SHuffle vs CyDisCo Side-by-Side Comparison

SHuffle在T7富培养基下产量5-450 mg/L；CyDisCo在9/10蛋白更高产量（反方证据）


NEB Endo S2 P0761 QC Specifications - 类比参照

[类比] QC复杂度估算参照，非P0733直接QC规格单


PHAC PSDS: Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium

官方PSDS，E. faecalis Risk Group 2，Containment Level 2要求


Samuel Merritt University Biosafety Manual Ver 2.0


E. faecalis & E. faecium Agent Safety Guide - USC EHS


GenScript BacPower E. coli Platform / Bestzyme CDMO Capability

[待验证] 金斯瑞BacPower 15g/L E.coli，2000L发酵规模；百斯杰2023年融资2.5亿RMB


Using Glycosidases to Remove, Trim, or Modify Glycans on Therapeutic Proteins

综述指出无已知广谱O-糖苷酶可切所有O-糖链，两款商业酶底物局限性明确（反方证据）


Optimizing recombinant protein expression via automated induction profiling in microtiter plates at different temperatures

Sivashanmugam A
Murray V
Cui C
Zhang Y
Wang J
Li Q

系统评估不同温度下IPTG浓度优化：最优IPTG为0.05–0.1 mM；高温时最优IPTG更低；支持低浓度IPTG用于改善可溶性


Production of soluble eukaryotic recombinant proteins in E. coli is favoured in early log-phase cultures induced at low temperature

San-Miguel T
Pérez-Bermejo P
Gavilanes F

系统证明低温（16–23°C）诱导显著改善>80 kDa蛋白可溶性；早期对数期+低温组合最优；支持EngEF低温诱导策略


SHuffle, a novel Escherichia coli protein expression strain capable of correctly folding disulfide bonded proteins in its cytoplasm

Lobstein J
Emrich CA
Jeans C
Faulkner M
Riggs P
Berkmen M

First author affiliated with NEB (SHuffle developer)

SHuffle T7菌株原始描述论文：Δgor ΔtrxB氧化胞质+染色体DsbC；T7富培养基下5–450 mg/L产量区间；适合多二硫键蛋白


The Ability to Enhance the Solubility of Its Fusion Partners Is an Intrinsic Property of Maltose-Binding Protein but Their Folding Is Either Spontaneous or Chaperone-Mediated

MBP溶解性增强机制（holdase）的系统研究；MBP融合将多种蛋白可溶性从<5%提升至30–60%；与NusA对比；作为标准溶解性标签被广泛引用


Enhancing the solubility of recombinant proteins in Escherichia coli by using hexahistidine-tagged maltose-binding protein as a fusion partner

His6-MBP双功能标签方法综述：允许IMAC一步纯化；MBP为最有效溶解性增强标签之一；可与任何目标蛋白融合


Fusion tags for protein solubility, purification and immunogenicity in Escherichia coli: the novel Fh8 system

MBP（43 kDa）和SUMO（~12 kDa）融合标签综述；TEV蛋白酶切除方案；SUMO适合N端敏感应用；支持MBP/SUMO策略选择依据


Engineering Bacillus subtilis for high-value bioproduction: recent advances and applications

B. subtilis占全球工业酶市场~60%；GRAS地位；天然分泌能力优势；WB600菌株分泌天冬酰胺酶407.6 U/mL；对比E. coli的包涵体劣势


Recombinant protein secretion by Bacillus subtilis and Lactococcus lactis: pathways, applications, and innovation potential

Applied Microbiology and Biotechnology (PMC8314018)

欧洲工业酶年营业额>20亿欧元；洗涤剂蛋白酶年产900吨纯酶；B. subtilis分泌能力综述；Sec通路详细机制


Bacillus subtilis NRRL 68054 GRAS Notice - FDA GRN Database

FDA GRN库中有25条B. subtilis相关GRAS通知，20条已获no-questions回函；证明B. subtilis GRAS地位的一级监管文件


Bottleneck in secretion of alpha-amylase in Bacillus subtilis

B. subtilis Sec通路分泌>80 kDa大蛋白存在瓶颈（反方证据）；α-淀粉酶案例；提示EngEF（108 kDa）迁移B. subtilis需截短体策略


Pichia pastoris: A highly successful expression system for optimal synthesis of foreign proteins

Pichia OCH1控制超糖基化；O-甘露糖化对酶活性的干扰综述；GlycoSwitch技术局限（主要针对N-糖，O-甘露糖化方案不完善）；支持否决Pichia用于O-糖苷酶的关键综述


Identification and Functional Characterization of Glycosylation of Recombinant Human Platelet-Derived Growth Factor-BB in Pichia pastoris

Pichia中PDGF-BB的O-甘露糖化定位（Thr96/Thr104）及其对功能影响；O-甘露糖化异质性导致蛋白结构/功能改变的案例证据


Engineering complex-type N-glycosylation in Pichia pastoris using GlycoSwitch technology

GlycoSwitch技术：OCH1敲除+异源糖基转移酶改造Pichia N-糖基化；每步工程约需3周；注意该技术主要针对N-糖，O-甘露糖化问题未解决（反方/限制证据）


CDC Quick Learn: Recognize the four Biosafety Levels

US Centers for Disease Control and Prevention

BSL-2要求：BSC操作+门禁+高压灭菌废物+工作人员培训。E. coli K-12衍生株（BL21/SHuffle）为BSL-1，全程兼容普通CDMO。来源CDC官方培训材料


O-Glycosidase from Streptococcus pneumoniae G1163 — Merck Sigma-Aldrich via SLS UK

Merck Sigma-Aldrich / Scientific Laboratory Supplies

scientificlabs.com (Merck authorized UK distributor)

英国区报价；美国区 Sigma-Aldrich G1163 定价需登录后查看，无法获取，本信源仅作欧洲市场参照


Bio-Techne Corporation (TECH) Income Statement FY2021-FY2025 — SEC 10-K Data

StockAnalysis.com (Fiscal.ai data aggregator)

Bio-Techne 作为生命科学试剂行业上市公司参照；NEB 毛利率类比估算基准；FY 截止 6 月 30 日


重组酶 E.coli 表达体系通用成本结构假设（内部推算）

国产重组酶与 NEB 同等 E.coli 表达体系，可类比 Bio-Techne 毛利结构

仅作估算支撑，不作为结论唯一来源


打破生物试剂进口垄断，国产细分龙头崛起（诺唯赞/翌圣生物深度研报）

国元证券研究所 东北证券

Wind/东方财富研报平台

券商研报，存在潜在利益关系但数据来源于公开招股书

数据主要针对分子酶品类（PCR 酶、逆转录酶），与 O-糖苷酶品类存在差异，外推需谨慎


China's Life Sciences Sector in Transition: How Suppliers Can Thrive in the Next Chapter

中国市场竞争加剧使 MNC 毛利受压

价格竞争在商品化品类最为激烈

高端细分 MNC 仍保持质量优势

中国替代在不同细分差异显著

L.E.K. 是 Tier 2 咨询机构，2024 年报告，时效性高，作为反方证据使用


Genovis OpeRATOR Lyophilized Product Page + Year-End Report January-December 2025

Genovis Official Website / Genovis Investor Relations

OpeRATOR 价格 2026-04-20 查询确认；Genovis 年收入约 SEK 1.29 亿（~€1,110 万），中型酶企业


O-Glycoprotease (IMPa) P0761S — NEB Product Page

未获取（需登录 NEB 账户）

IMPa 为 NEB 旗下下一代 O-糖蛋白酶，与 Genovis OpeRATOR 构成工程酶市场双寡头；具体售价未获取，需进一步查询


Glycomics Market Size, Share, Growth & Trends Report 2030 — Drug Discovery Segment

制药/生物技术公司2025年贡献48.62%的糖组学市场营收；ADC应用是关键增长驱动


Glycobiology Market — Enzyme & Product Analysis (Coherent Market Insights)

酶类产品占糖生物学产品价值约40-55%，是最大品类


U.S. Glycomics Market Size & Share | Industry Report, 2030 (Grand View Research)

学术与科研机构2023年占糖组学终端用户约39%，居最高；药物发现占最大应用份额


翌圣生物科技（上海）股份有限公司招股说明书（科创板上会稿，含Frost & Sullivan中国生物试剂市场数据）

翌圣生物科技（上海）股份有限公司

上市申请文件，公司自身利益相关，但数据引自独立Frost & Sullivan报告

2021年中国生物试剂科研市场规模183亿元；进口品牌占科研机构用户市场约90%；是中国生物试剂市场最权威的一手披露来源之一


ICH Q2(R2) Guideline on Validation of Analytical Procedures — Step 5 (EMA effective June 2024)

试剂变更须评估是否需部分或全部重验证

specificity precision accuracy linearity robustness

ICH Q2(R2) 2023年修订版，EMA 2024年6月生效；引入分析生命周期管理框架；CMC方法验证的最高权威指引


IgA Nephropathy in China: Epidemiology, Clinical Features and Disease Burden (多篇系统综述合并引用)

[待验证] 500万例数字见于多篇meta分析，建议回溯CNKI原始流行病学调查文献校正


WuXi XDC Cayman Inc. Annual Report 2024

药明合联（WuXi XDC）
港交所

港交所上市公司年报（2268.HK）

公司自身年报，数据可信但存在选择性披露可能

截至2024年12月31日194个正在进行的iCMC整合项目；分析表征使用HPLC/ELISA/LC-MS测量包括糖基化在内的关键参数


How are ADC drug partnerships changing China's biotech landscape? (Invesco, October 2024)

投资机构，可能有立场偏向中国biotech积极叙事

中国ADC对外授权交易2022-2024年35笔，超过美国25笔，是全球最大授权国；截至2024年全球230+款ADC在临床


华创证券·医药投资观点周周谈第70期：造影剂市场国产替代东风已至（含生命科学服务进口替代板块）

券商研报，可能存在推荐标的利益

仅作辅助引用；核心数据引自公开招股书；生物科研试剂2021年国产份额约10%（科研端）


Analytical Procedures and Methods Validation for Drugs and Biologics — FDA Guidance for Industry

试剂更换 实验室迁移 制造工艺变更

已批准BLA/NDA中分析方法的重大变更需PAS

FDA现行有效指引；试剂替换触发再验证或等效性研究；商业化阶段变更需PAS并等待监管审批


Best practices for the development, validation and registration of analytical procedures — Implementation of ICH Q2(R2) and Q14 for biologics (BioPhorum)

Analytical Procedure Lifecycle Management Document

Analytical Procedure Document included in regulatory submissions

Reagent supplier change triggers Change Control under ICH Q2(R2)/Q14 lifecycle framework

BioPhorum是制药行业联盟（无商业利益冲突）；ICH Q2(R2)+Q14联合实施最佳实践；分析程序档案（APD）中供应商信息一旦注册即形成变更控制壁垒


Genovis AB Interim Report January–September 2024

Genovis AB (Nasdaq First North Growth Market)

公司自身财务报告，存在选择性披露可能

2024年Q3酶类（analytics）销售额SEK 3,160万，同比增长24%，创单季历史新高；增长主要来自ADC技术相关大单；证明ADC驱动的糖分析酶市场实质性扩张


New England Biolabs TCEFS 2025 Pricing List (effective 2025-01-29)

New England Biolabs
UMass Medical School TCEFS Contract

UMass Medical School Enzyme Freezer / NEB

NEB TCEFS 2025协议价格表：P0733S $137, P0733L $525, E0540S $190（O-糖苷酶+神经氨酸酶捆绑），P0720S神经氨酸酶$87。这是 NEB O-糖苷酶产品线精确定价的最可靠公开来源


O-Glycosidase & α2-3,6,8 Neuraminidase Bundle E0540S — BIOKÉ NL Product Page

P0733S vial 0.05ml 50000units/ml
P0720S vial 0.04ml 50000units/ml
GlycoBuffer 2 1ml 10X
NP-40 1ml 10%
Glycoprotein Denaturing Buffer 1ml 10X

NEB E0540S欧洲分销价€242；产品组成验证：双酶（O-糖苷酶+神经氨酸酶）+三种缓冲液组件；注：分销商价格非NEB官网直销价，仅作参照


Genovis SmartEnzymes Store — Complete Product Lineup with Official Pricing 2026

OglyZOR（O-糖苷酶，SpGH101来源）€1,079/2000u；OmniGLYZOR（N+O糖全套工作流套装）€1,524-2,739；SialEXO€781；为竞品工作流套装定价的核心参照数据


GenScript BacPower™ E. coli Protein Expression Service — Technical Handbook & Service Brochure

GenScript Official Technical Documentation

GenScript官方材料，商业利益相关，降权使用

金斯瑞 BacPower™ 技术手册，明确支持 E. coli 1L-2000L 发酵规模，最大 3 吨湿菌体，克级蛋白纯度 ≥98%；具备包涵体复性平台 FoldArt™；是第 8 章 CDMO 能力矩阵金斯瑞一行的核心来源。


合成生物学业务被市场看好 金斯瑞旗下百斯杰获2.5亿元融资

金斯瑞生物科技股份有限公司（HK:1548）

上市公司官方公告，存在正面表述偏向，但融资数据为法律意义上的公开披露

全国酶制剂行业十强 国家级专精特新小巨人 省高成长中小企业

百斯杰 2023 A 轮融资 2.5 亿 RMB，高瓴领投 1 亿，投后估值约 24 亿 RMB；金斯瑞间接持股 82.5917%；百斯杰已开发 20+ 自主知识产权工业酶，全国酶制剂十强企业。


南京诺唯赞生物科技股份有限公司 2025 年半年度报告

南京诺唯赞生物科技股份有限公司

上市公司半年报，存在选择性正面表述可能，但财务数据受证监会监管

诺唯赞龙潭 GMP 车间已运行 GMP 级 10L-100L 发酵线；年产能满足 250 kg mRNA 生产；质量体系参照 GMP/ICH Q7/Q10/ISO 9001；2025H1 通过 SGS 官方复审，是研究级酶 GMP 生产的重要行业参照。


细胞基因治疗CDMO行业深度报告（含CRB 2020行业调查数据，CDMO选择原因分布）

中国医药工业信息中心/东吴证券

券商研报，可能存在推荐标的利益；但 CRB 数据为独立第三方调查

CRB 2020 调查：54% 企业选 CDMO 首因是'有限 GMP 能力'；CDMO 代工费占收入 15–25% 为行业均值；仅为估算参考，非 O-糖苷酶研究试剂级具体报价。[待验证：需获取专项报价]


生物安全实验室建设每平方米造价参考 + ISO 13485认证费用行业参考（美泰诺格实验室工程公司）

工程商网站，存在报价偏高动机

30-80万（行业参考）

Tier 4，仅用于量级参考；GMP 建设成本决策时建议向至少 3 家专业工程公司获取正式报价校正。


中科院上海有机所高级人才招聘启事（糖化学生物学）+ 中科院过程工程研究所糖生物工程课题组招聘

中国科学院上海有机化学研究所 中国科学院过程工程研究所

糖化学生物学方向研究员/课题组长

酶催化合成实验员/工程师（人才派遣）

SIOC 和过程工程所的糖生物学/糖化学人才招聘公告证明该方向人才主要向学术机构聚集；企业需提供 2–3 倍薪酬溢价才能竞争到此类人才。


中国科学院天津工业生物技术研究所2026年招聘启事（糖生物学/酶工程方向博士后）

中国科学院天津工业生物技术研究所

优秀人才网（中科院天津工业所授权发布）

糖生物学 酶工程 多酶级联反应

天津工业所朱之光课题组招募糖生物学/酶工程博士后（2026年）；特别博士后年薪约 34 万税前（含公积金）+ 天津生活补贴 15 万/年；企业糖生物学 PI 需提供 2–3 倍溢价（80–120 万+股权）才具竞争力。


生物医药行业薪酬参考数据（BOSS直聘/领英公开招聘 2024–2026）

Tier 4，基于公开招聘页面薪酬区间汇总，仅作首年团队薪酬总包量级估算；PI 薪酬区间弹性大，实际取决于候选人背景和谈判。


Challenges Associated With the Formation of Recombinant Protein Inclusion Bodies in Escherichia coli and Strategies to Address Them for Industrial Applications

50-70%（未优化条件下，综合多篇综述估算）

E.coli过表达>80 kDa蛋白时包涵体发生率综合综述；是ch09 T1技术风险评分（概率4/5）的文献支撑；2021年综述，时效性可接受


Enhanced Recombinant Protein Production of Soluble, Highly Active and Immobilizable PNGase F

stable 24 months at -20°C in 50% glycerol

类比GH101推算8-14周工艺周期

PNGase F重组表达优化案例；作为GH101开发时间表和活性验证周期的类比参照；2022年Biomolecules（MDPI，IF约4.0）。注：PNGase F（37 kDa）远小于EngEF（108 kDa），类比须谨慎。


Provisions for In-Vitro Diagnostic Reagent Registration and Filing (NMPA Order No.48, 2021) — English version

仅供研究不用于诊断产品豁免注册，须标注RUO字样

NMPA 2021年第48号令最新有效文本；IVD Class I仅需备案；RUO产品豁免注册是O-糖苷酶科研试剂18个月路径的关键合规依据；英文版本核查补充：中文版见国家药监局官网，英文版2024-06-05发布


CDMO selection: Startups need patience, humility, and good faith

CDMO合作成功依赖信任和持续沟通；放大失败和批间一致性是常见问题；建议初创企业与有经验CDMO合作即使成本更高

BPI行业媒体文章，BPI Europe 2024会议报道；支持双CDMO布局策略和T3批间一致性风险评分逻辑


5 Reasons Why Biotech Startups Fail: How to Avoid Them

失败越晚越贵，应在早期设置Go/No-Go决策点；36%生物技术公司在初期阶段退出

Failure is just more painful and expensive the later it happens

Tier3行业媒体；仅用于支持Kill Criteria设置的管理逻辑合理性，不作为核心技术结论唯一支撑


Structural basis of mammalian mucin processing by the human gut O-glycopeptidase OgpA from Akkermansia muciniphila

水解O-糖基化Ser/Thr残基N端肽键

OpeRATOR结构解析奠基论文；2020年Nat Commun IF~17，102次引用；Trastoy/Guerin为学术作者，结构数据独立；利益冲突已声明，评分降0.5分；是OpeRATOR商品化的科学基石


Genovis OpeRATOR Lyophilized / ImpaRATOR Lyophilized — Product Pages and Annual Report 2024

Genovis official website + MFN Annual Report 2024

Genovis是这些产品的销售方，定价和规格数据存在商业利益

core 1 O-glycans, requires SialEXO for sialylated substrates

Pseudomonas aeruginosa expressed in E. coli

broad including sialylated Core 1 and Core 2, Tn antigen

limited activity at sites with two adjacent glycosylated Ser/Thr

Genovis官网产品页（2025年检索）及2024年年报；产品参数直接来自商业页面，是定价和规格的第一手数据；需注意商业利益因素，但技术规格无动机虚报


Glycoproteomic landscape and structural dynamics of TIM family immune checkpoints enabled by mucinase SmE

Chongsaritsinsuk J
Steigmeyer AD
Mahoney KE
Rosenfeld MA
Lucas TM
Smith CM
Malaker SA
et al.

Serratia marcescens (M60-like metallopeptidase)

cleaves at complex glycans and adjacent O-glycosites, no sialidase required

does not cleave between two adjacent glycosylated residues (confirmed)

SmE定义性论文；首次完成TIM家族完整O-糖组学图谱；提供OgpA/IMPa/SmE三款酶的直接基准测试数据；2023年Nat Commun，是迄今O-糖肽酶领域覆盖面最广的比较研究


A Broad-Specificity O-Glycoprotease That Enables Improved Analysis of Glycoproteins and Glycopeptides Containing Intact Complex O-Glycans

Vainauskas S
Duke RM
McFarland M
McClung C
Taron CH

yes - cleaves sialylated Core 1, sialylated Core 2, Tn antigen

Pro-Ser/Thr motif (proline at P1 position)

one-step O-glycoproteomic workflow for G-CSF glycoprofiling

ImpaRATOR (Genovis, also NEB-distributed)

IMPa定义性论文；NEB内部研究但发表于ACS Analytical Chemistry（IF~8.0）；奠定ImpaRATOR商品化基础；NEB利益冲突已声明，但方法学独立性可接受；sialic acid tolerance是O-糖肽酶领域里程碑突破


Structural evidence for a proline-specific glycopeptide recognition domain in an O-glycopeptidase

crystal structure with O-glycopeptide complex (PDB: 5KDX)

proline recognition domain with 4-aromatic bowl binding Pro-Ser/Thr-O-glycan motif

aromatic bowl accommodates proline; GalNAc wraps around Tyr residue via CH-π interaction

Tyr116 of OgpA binds Gal rather than Sia, explaining sialic acid sensitivity contrast

Noach/Boraston（UBC）独立学术研究，无利益冲突；揭示IMPa唾液酸耐受的结构基础，为工程改造提供靶点；2021年Glycobiology（IF~4.7）


Targeted glycan degradation potentiates the anticancer immune response in vivo

Gray MA
Stanczak MA
Mantuano NR
Xiao H
Pijnenborg JFA
Malaker SA
Bertozzi CR
et al.

Bertozzi是Palleon创始人，有商业利益；但学术论文数据独立

antibody-enzyme conjugate with sialidase for glycocalyx editing

first in vivo proof of targeted glycocalyx degradation for cancer immunotherapy

Gray/Bertozzi 2020 Nat Chem Biol；确立靶向糖萼降解促肿瘤免疫的体内概念验证，是eStcE治疗化研究的直接前驱；Palleon E-602的学术基础之一


Stanford University Technology - Cell-type specific enzymatic degradation of pathological mucins (eStcE fusion construct, WO2023212733)

Stanford University - Office of Technology Licensing

fusion constructs of engineered mucinase + cancer antigen-targeting nanobody/antibody

Pedram K, Shon DJ, Tender GS, Bertozzi CR et al.

Stanford官方技术转让页面；WO2023212733专利核心权利要求针对'融合构型'（eStcE+靶向纳米抗体），eStcE酶本体的单独使用和非HER2靶向构型是否被覆盖需进一步检索full claims；是判断IP空白空间的关键文件


Palleon Pharmaceuticals E-602 (HLX79) Phase 1/2 GLIMMER-01 + Phase 2 Glomerulonephritis Trial

ClinicalTrials.gov + Palleon Press Releases

Palleon是商业公司，但IND/临床进展是公开官方事实

Phase 1/2, solid tumors, sialidase-Fc E-602 + cemiplimab

Palleon E-602是Bertozzi实验室糖萼编辑疗法进入临床的第一个分子（唾液酸酶，非mucinase），但已证明微生物来源工程糖苷酶的人体注射安全性概念；对eStcE治疗化路径有重要参考意义；IND窗口预估依据Palleon从基础研究(2015)到Phase1(2022)约7年的时间线


The protease cathepsin K can debulk the cancer glycocalyx

Journal of Biological Chemistry (PubMed ID: 41581870)

Bertozzi多家公司创始人；但学术独立数据

CTSK (cathepsin K, human enzyme) uniquely degrades cell-surface mucins, proteoglycans, polysialylated glycoproteins

humanized alternative to bacterial mucinase eStcE, addresses immunogenicity concern

2026年JBC；提示治疗化mucinase正向人源化方向演进，缓解细菌来源免疫原性担忧；与eStcE构成技术竞争路径；是判断'治疗化赛道仍早期'的最新数据点


Carbohydrate-active enzyme (CAZyme) discovery and engineering via (Ultra)high-throughput screening

MELiORA listed as most promising uHTS platform for CAZyme engineering

O-glycopeptidases, glycosyltransferases, glycoside hydrolases

Wardman/Withers 2024 RSC Chem Biol综述；MELiORA平台扩展应用综述；是MELiORA成为CAZyme工程标准方法的佐证文献


Reshaping of a Glycoside Hydrolase Active Site through Expression-Compensated Droplet-Based Microfluidic Screening Provides Useful Tools for Glycomics

SpGH101 Q868G variant directed evolution

expression-compensated droplet-based microfluidic FACS

improved variants with enhanced sialyl T-antigen cleavage activity beyond Q868G

Wardman/Withers 2025 ACS Central Science；对Q868G骨架进行液滴微流控定向进化的最新成果；证明单点突变可进一步工程化；是双路线IP布局中路线一的关键科学支撑；2025年最新发表


AlphaFold3 — Accurate Structure Prediction of Biomolecular Interactions (Nature 2024) and AI-Driven De Novo Protein Design in Enzyme Engineering

Nature (AlphaFold3) + Biology MDPI review

predict biomolecular complexes including proteins, small molecules, modified residues

multiple labs use AF3 for carbohydrate-active enzyme structure analysis and virtual mutant screening

AlphaFold3 Nature 2024原文；结合MDPIreview（Biology 2025，14:1268）对AI蛋白设计在酶工程中应用的综述；AF3是工程酶赛道加速的关键工具；降低理性设计成本数量级


PCT Filing Costs and Fees: Complete Breakdown — Teak IP Services / USPTO PCT Fees in USD

Teak IP为专利服务公司，有推荐服务动机；但USPTO官方费率无利益冲突

PCT费率参考；USPTO官方费率为基准，Teak IP提供完整成本分解；用于第12章预算支撑；利益冲突注意但数量级可信


Prevalence and trend of biopsy-proven IgA nephropathy in China: a systematic review

2025年发表的中国IgAN最全面系统综述，覆盖34个省市143,176例原发性肾小球疾病活检数据；IgAN占39.73%，是中国最常见原发性肾小球疾病。Italian Society of Nephrology旗下期刊。Tier 1学术文献。


IgA Nephropathy Epidemiology and Market Forecast 2034 — China & 7MM

DelveInsight为Tier 2医疗市场报告，2024年数据；7MM+中国IgAN患者约190万例（2022年）；中国实际患者规模需考虑活检率不足因素，为中国IgAN市场规模的主要公开引用来源


China Government Procurement Domestic Product Standards — Ministry of Finance/MIIT Notice (effective 2026-01-01)

Ministry of Industry and Information Technology

www.gov.cn (Official China Government Portal)

both domestic and foreign-invested enterprises meeting domestic product criteria

manufactured or substantially transformed in China

NMPA domestic device registration certificate = domestic product

2025年12月19日中国财政部+工信部联合发布，2026年1月1日起国产品在政府采购中享有20%评价价格优惠；医疗器械以NMPA国产注册证为'国产'认定依据；是支持供应链轴政策东风的Tier 1监管文件


KDIGO 2025 Clinical Practice Guideline for the Management of IgA Nephropathy and IgA Vasculitis

Kidney Disease: Improving Global Outcomes (KDIGO) IgAN Work Group

kidney biopsy gold standard; NO validated serum/urine biomarker for diagnosis

KDIGO 2025 IgAN/IgAV临床实践指南；明确'目前无经过验证的血清或尿液诊断标志物'；肾活检仍是诊断金标准；东亚裔最高发病率；全球最权威IgAN管理指南，Tier 1监管/临床文献


Gd-IgA1 Biomarker Screening Service — Cincinnati Children's Hospital Nephrology Clinical Laboratory

Cincinnati Children's Hospital Medical Center

Cincinnati Children's Hospital (CLIA/CAP certified clinical laboratory)

High-sensitivity ELISA, CAP/CLIA/GCLP validated

IgA-capture reagent + lectin-based galactose-deficient O-glycan detection

Cincinnati Children's于2025年推出临床Gd-IgA1检测服务，AUC=0.950；CLIA/CAP/GCLP认证；是当前最高规格临床Gd-IgA1实验室检测的性能标杆；印证高特异性诊断试剂需求已经出现


Everest Medicines: NMPA Full Approval of NEFECON for IgA Nephropathy (May 2025)

primary IgAN, eGFR≥30 mL/min regardless of proteinuria

NEFECON获NMPA全批准，扩大至不限蛋白尿水平的成人IgAN患者；中国每年新确诊IgAN逾10万例；已纳入31省市NRDL；印证IgAN诊疗市场快速标准化，对诊断试剂需求产生正向拉动


Analysis of O-glycoforms of the IgA1 hinge region by sequential deglycosylation

Scientific Reports (Nature Publishing Group)

neuraminidase + O-glycanase sequential deglycosylation for IgA1 HR O-glycoform analysis

EngEF superior: 0.42% disaccharides remaining vs 63.94% for SpGH101 after O-glycanase treatment

LC-MS based Gd-IgA1 site-specific quantification

up to 6 clustered O-glycans on hinge region

Renfrow/Novak 2020 Sci Rep；确立顺序脱糖（神经氨酸酶→O-糖苷酶）是IgA1铰链区Gd-O-糖型定量分析的标准工作流；EngEF在此工作流中优于SpGH101（残余二糖0.42% vs 63.94%）；是O-糖苷酶进入IgAN诊断市场的核心技术依据